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millipore 0.5ml超滤离心管的相关信息及使用操作

点击次数:107 发布时间:2019-05-28

   millipore 0.5ml超滤离心管的相关信息及使用操作

  millipore 0.5ml超滤离心管可用于生物样品纯化、蛋白质浓缩、脱盐和缓冲液更换,垂直结构的膜减少了浓差极化,快速离心并可直接吸取回收样本,浓缩倍数高达80-100倍,是样本处理的得力助手。
  millipore 0.5ml超滤离心管相关信息:
  ⑴最大起始样品处理量:5ml,典型浓缩后终体积为200ul;
  ⑵内置过滤膜为聚醚砜或再生纤维素滤膜;
  ⑶适合50ML离心机转子;
  ⑷最大离心力:吊篮式转子为4000×g;35°固定角度转子5000×g;
  ⑸尺寸:有效膜面积为7.8cm2,直径为36.5mm,长度为120mm;
  ⑹管壁上标有截留规格。
  1、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,millipore 0.5ml超滤离心管需要插在冰上预冷。
  2、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速rpm换算成g之后,有所不同。具体可参阅附件里的说明书。离心机的加速度调至最低档,减小对膜的压力。注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法第一时间处理,后果不可预测!膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。
  3、当浓缩到剩下1ml时,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的Buffer,直到蛋白不发生沉淀为止。
  4、前面几步用以浓缩蛋白,如果要换Buffer,在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候,轻轻加入新的Buffer(经0.22um超滤膜超滤),再浓缩至1ml左右,连续三次,最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定,一般不多于500ul,也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算,三次达到1000倍以上,基本上可以达到换buffer的目的。
  5、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作,用黄枪头(200ul)取,轻轻顺着边缘插入枪头,轻轻吹打、混匀蛋白液,注意不要碰到超滤膜,然后吸取浓缩液,每次吸接近200ul,直到吸完。管底剩下的最后一点浓缩液不必吸取,否则难度太大,有可能损坏超滤膜。最后加入MilliQ水到超滤管中,没过超滤膜,防止膜失水变干。
  以上便是今天关于millipore 0.5ml超滤离心管的相关信息及使用操作的全部分享了,希望对大家今后使用本设备能有帮助。
 
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